植物油中苯并(a)芘檢測的固相萃取方法
（Copure ® 苯并芘檢測柱）
一、實驗?zāi)康?br />
本研究利用固相萃取法作為植物油的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測其中苯并(a)芘的含量。該方法 可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗?zāi)繕?biāo)物
苯并(a)芘(CAS:50-32-8)。
三、應(yīng)用范圍
本方法適用于植物油中苯并(a)芘的檢測的HPLC檢測及確證。
四、參考標(biāo)準(zhǔn)
《GB/T 22509-2008動植物油脂苯并(a)芘的測定 反相高效液相色譜法》。
五、實驗材料
biocomma ® Copure ®苯并芘檢測柱22g/60mL(Cat. No. COBAP6022G)。
六、實驗步驟
1、樣品提取
準(zhǔn)確稱取植物油樣品0.4 g于15 mL離心管中加入5 mL 正己烷， 渦旋1 min。待凈化。
2、SPE柱凈化
(1) 活化：苯并芘檢測柱使用前用30 mL正己烷活化 。
(2) 上樣和洗脫：在苯并芘檢測柱上加入待凈化樣品，收集流出液，然后用40 mL正己烷-二氯甲烷溶液（3:1，
v/v）洗脫，收集流出液，合并流出液。（在上樣洗脫的過程中，要注意柱體不能干涸。)
(3) 重新溶解：流出液50 ℃減壓蒸餾至近干，加1 mL甲基叔丁基醚定容，過0.45 μm濾膜，待上機測試。
3、HPLC條件
設(shè) 備：Waters Alliance 2695
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5μm)
檢測器 ：Waters 2475熒光檢測器
流動相：A：乙腈 B：水
洗脫方式：等度洗脫 A:B=88:12
流速：1 mL/min
發(fā)射波長：406 nm
激發(fā)波長：384 nm
進樣體積: 10 μL
七、實驗結(jié)果
1、0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘添加回收結(jié)果
表1 0.05 mg/kg植物油中的苯并(a)芘添加回收結(jié)果
2、添加水平為0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖
（Copure ® 苯并芘檢測柱）
一、實驗?zāi)康?br />
本研究利用固相萃取法作為植物油的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測其中苯并(a)芘的含量。該方法 可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗?zāi)繕?biāo)物
苯并(a)芘(CAS:50-32-8)。
三、應(yīng)用范圍
本方法適用于植物油中苯并(a)芘的檢測的HPLC檢測及確證。
四、參考標(biāo)準(zhǔn)
《GB/T 22509-2008動植物油脂苯并(a)芘的測定 反相高效液相色譜法》。
五、實驗材料
biocomma ® Copure ®苯并芘檢測柱22g/60mL(Cat. No. COBAP6022G)。
六、實驗步驟
1、樣品提取
準(zhǔn)確稱取植物油樣品0.4 g于15 mL離心管中加入5 mL 正己烷， 渦旋1 min。待凈化。
2、SPE柱凈化
(1) 活化：苯并芘檢測柱使用前用30 mL正己烷活化 。
(2) 上樣和洗脫：在苯并芘檢測柱上加入待凈化樣品，收集流出液，然后用40 mL正己烷-二氯甲烷溶液（3:1，
v/v）洗脫，收集流出液，合并流出液。（在上樣洗脫的過程中，要注意柱體不能干涸。)
(3) 重新溶解：流出液50 ℃減壓蒸餾至近干，加1 mL甲基叔丁基醚定容，過0.45 μm濾膜，待上機測試。
3、HPLC條件
設(shè) 備：Waters Alliance 2695
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5μm)
檢測器 ：Waters 2475熒光檢測器
流動相：A：乙腈 B：水
洗脫方式：等度洗脫 A:B=88:12
流速：1 mL/min
發(fā)射波長：406 nm
激發(fā)波長：384 nm
進樣體積: 10 μL
七、實驗結(jié)果
1、0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘添加回收結(jié)果
表1 0.05 mg/kg植物油中的苯并(a)芘添加回收結(jié)果
2、添加水平為0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為0.05 mg/kg植物油中苯并(a)芘檢測的液相色譜圖
