逗點(diǎn)生物新推出血清中β-受體激動(dòng)劑檢測的固相萃取方法HLB

   2017-12-27 原創(chuàng)699
核心提示:血清中-受體激動(dòng)劑檢測的固相萃取方法(CopureHLB)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康谋狙芯坷霉滔噍腿》ㄗ鳛闃悠返那疤幚矸椒ǎ琀PLC法作為分析方法
血清中β-受體激動(dòng)劑檢測的固相萃取方法

(Copure ® HLB)

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法,HPLC法作為分析方法,檢測血清中β受體激動(dòng)劑含量。該方 法可簡化樣品的前處理過程,節(jié)省有機(jī)溶劑的使用,操作簡便。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物
 沙丁胺醇 (CAS:18559-94-9)、班布特羅(CAS:81732-65-2)、克倫特羅(CAS:129138-58-5)、萊克多巴胺 (CAS:97825-25-7)。

三、應(yīng)用范圍
本方法適用于血清中β-受體激動(dòng)劑的檢測的HPLC檢測及確證。

四、實(shí)驗(yàn)材料
biocomma ®Copure ® HLB固相萃取柱60 mg/3 mL (Cat. No. COHLB360)。

五、實(shí)驗(yàn)步驟
1、樣品提取
準(zhǔn)確移取樣品1.0 mL血清樣品,備用。

2、SPE柱凈化
(1)活化:HLB固相萃取柱使用前用1 mL甲醇、1mL水活化 。
 (2)上樣和洗脫:在HLB固相萃取柱上加入1 mL血清樣品,棄去流出液; 用1 mL 5%甲醇水溶液(v/v)、淋 洗,棄去淋洗液;抽干小柱;用2 mL甲醇溶液洗脫,收集洗脫液(整個(gè)上樣、洗脫過程保持流速1mL/min)。
 (3)重新溶解:50 ℃緩慢氮?dú)饬鳁l件下吹至近干,用1 mL 甲醇溶液溶解。經(jīng)0.22 μm濾膜重新過濾,供高效液 相色譜測定。

3、HPLC條件
設(shè) 備:Waters Alliance 2695
色譜柱 :Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm)
檢測器 :Waters 2475 熒光檢測器
檢測波長:激發(fā)波長:206 nm
發(fā)射波長: 226 nm
流動(dòng)相:A:乙腈 B: 0.1%甲酸水
表1: 梯度洗脫條件
血清中β-受體激動(dòng)劑檢測的固相萃取方法1
流速:1.0 mL/min
進(jìn)樣體積:20 μL

六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、1 mg/kg血清中β-受體激動(dòng)劑的添加回收結(jié)果
表1 1 mg/kg血清中β-受體激動(dòng)劑的添加回收結(jié)果
血清中β-受體激動(dòng)劑檢測的固相萃取方法2
2、添加水平為1 mg/kg血清中β-受體激動(dòng)劑檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為1 mg/kg血清中β-受體激動(dòng)劑檢測的液相色譜圖
血清中β-受體激動(dòng)劑檢測的固相萃取方法3


 
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