普洱中農藥多殘留檢測的固相萃取方法
（Copure®GCB/NH2）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，GC-ECD和LC-MS/MS作為分析方法，檢測普洱中的農藥殘留水平。該方法操作簡便，可簡化樣品前處理過程，減少有機溶劑的使用。
二、應用范圍
本方法適用于茶葉中有機磷類、有機氯類、擬除蟲菊酯類和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定。
三、實驗材料
biocomma® Copure® GCB/NH2固相萃取柱500mg/500mg/6mL(Cat.No.CONHGC655)。
四、實驗步驟
1、樣品提取
稱取粉碎好的普洱2g(精確到0.001g)，加入50mL離心管中，加入10mL乙腈，劇烈振蕩1min，靜置
30 min，4000r/min離心5min。上清液待凈化。
2、SPE柱凈化
(1) 活化：GCB/NH2固相萃取柱中加入約2cm高無水硫酸鈉，使用前使用10mL乙腈-甲苯(3:1，v/v)活化。
(2) 上樣和洗脫：當溶液液面到達柱吸附層表面時，立即倒入上述待凈化溶液4 mL, 用雞心瓶接收流出液，逐步
加入25mL乙腈-甲苯(3:1，v/v)洗滌小柱，收集上述所有流出液于雞心瓶中。
(3)重新溶解：流出液于40℃水浴中旋蒸至1mL左右，加入2mL乙腈轉移至10mL試管中，于40℃下氮氣吹干，加入1mL乙腈溶解殘渣，0.22μm微孔濾膜過濾，分別供GC-ECD和LC-MS/MS上機測試。
3、儀器條件
1.GC-ECD條件
氣相儀器：Agilent 7890A
色譜柱：Agilent J&W HP-5, 30 m × 0.32 mm，0.25μm或者相當者
進樣口溫度：220℃
檢測器溫度：300℃
升溫程序：
180 ℃(保持2 min)
以10℃/min升溫到230℃(保持2 min)
以2℃/min升溫到260℃(保持2 min)
以25℃/min升溫到270℃(保持1.6 min)
載氣：氦氣
流速：1.6 mL/min
進樣方式：分流進樣，分流比10:1
2.LC-MS/MS條件
色譜柱：Venusil ASB C18(2.1 mm×150 mm, 5 μm)
質譜儀：API 4000
流動相：A:0.1% HCOOH+10 mM乙酸銨(取1 mL HCOOH和0.77g乙酸銨至1L水溶液中)
B: 甲醇溶液
洗脫方式：梯度洗脫
表1流動相梯度洗脫程序
流速：0.35 mL/min
柱溫： 40 ℃
進樣體積：5μL
離子源：電噴霧(ESI)
掃描模式：正離子模式
檢測方式：多反應監測(MRM)
表2質譜儀離子源參數
表3氨基甲酸酯類農藥各組分名稱、保留時間及母離子和子離子檢測離子對
五、實驗結果
1、普洱中農藥多殘留的添加回收結果
表4 0.25mg/kg普洱中有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多殘留的添加回收結果
表5 0.05mg/kg普洱中氨基甲酸酯類農藥多殘留的添加回收結果
2、普洱中農藥多殘留檢測色譜圖
圖1添加水平為0.25mg/kg普洱中有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多殘留檢測色譜圖
圖2添加水平為0.0625mg/kg普洱氨基甲酸酯類農藥多殘留檢測色譜圖
