近日，中國熱科院生物所熱帶作物病毒病害與防控研究團隊聯合海南醫學院等單位開發了一套基于Nimble Cloning的標準化植物表達載體，為大規模的植物基因功能分析提供了一套高通量的載體工具，并為推動分子克隆領域標準化的形成奠定了基礎。
Nimble Cloning（NC克?。┦侵袊鵁峥圃荷锼谇捌谘芯恐虚_發的新型分子克隆技術。在此基礎上，本研究繼續開發了一套基于Nimble Cloning的植物表達載體（pNC載體系統），具有Nimble Cloning的主要優點：1. 操作簡單。目標基因可以通過一步克隆反應直接連接到載體，避免了載體的酶切、回收過程。2. 標準化。該套載體均具有NC克隆的通用接頭序列，目標基因攜帶通用接頭后可克隆到該系統任一載體，解決了不同載體需要重新設計引物和擴增基因的問題（圖1）。這兩個優點使得pNC載體系統適合高通量的載體構建。
該套載體工具由55個植物表達載體組成，涵蓋了多種常用的植物表達載體框架（植物T-DNA載體框架pCambia、pGreen和pBI121，以及植物瞬時表達載體框架）、抗性篩選基因（潮霉素、卡那霉素和除草劑抗性基因）和報告基因（GUS、GFP、CFP、RFP和mCherry）（圖2），具備在植物研究領域廣泛使用的基礎。該套載體均具有用于Nimble Cloning的NC克隆框，形成了一套標準化的載體系統，為植物功能基因組研究提供了一個標準化的分析平臺。
該研究成果以《A Nimble Cloning-compatible vector system for high-throughput gene functional analysis in plants》為題發表于《Plant Communications》。中國熱科院生物所青年研究員言普為論文第一作者；中國熱科院生物所青年研究員言普、研究員周鵬和海南醫學院副教授高新征為論文共同通訊作者。中國熱科院生物所和三亞研究院為第一完成單位。該研究得到海南省自然科學基金和中央級公益性科研院所基本科研業務費專項資助。
文章鏈接：https://doi.org/10.1016/j.xplc.2022.100471
日期：2022-11-29
Nimble Cloning（NC克?。┦侵袊鵁峥圃荷锼谇捌谘芯恐虚_發的新型分子克隆技術。在此基礎上，本研究繼續開發了一套基于Nimble Cloning的植物表達載體（pNC載體系統），具有Nimble Cloning的主要優點：1. 操作簡單。目標基因可以通過一步克隆反應直接連接到載體，避免了載體的酶切、回收過程。2. 標準化。該套載體均具有NC克隆的通用接頭序列，目標基因攜帶通用接頭后可克隆到該系統任一載體，解決了不同載體需要重新設計引物和擴增基因的問題（圖1）。這兩個優點使得pNC載體系統適合高通量的載體構建。
該套載體工具由55個植物表達載體組成，涵蓋了多種常用的植物表達載體框架（植物T-DNA載體框架pCambia、pGreen和pBI121，以及植物瞬時表達載體框架）、抗性篩選基因（潮霉素、卡那霉素和除草劑抗性基因）和報告基因（GUS、GFP、CFP、RFP和mCherry）（圖2），具備在植物研究領域廣泛使用的基礎。該套載體均具有用于Nimble Cloning的NC克隆框，形成了一套標準化的載體系統，為植物功能基因組研究提供了一個標準化的分析平臺。
該研究成果以《A Nimble Cloning-compatible vector system for high-throughput gene functional analysis in plants》為題發表于《Plant Communications》。中國熱科院生物所青年研究員言普為論文第一作者；中國熱科院生物所青年研究員言普、研究員周鵬和海南醫學院副教授高新征為論文共同通訊作者。中國熱科院生物所和三亞研究院為第一完成單位。該研究得到海南省自然科學基金和中央級公益性科研院所基本科研業務費專項資助。
文章鏈接：https://doi.org/10.1016/j.xplc.2022.100471
日期：2022-11-29
