




3.1引言富含GABA的食品被證明具有多種生理功能,其中富含GABA的米胚芽的生理功能包括:、腎功能活性化、肝功能活性化、預防、促進乙醇代謝及消臭等作用。研究表明富含GABA米胚芽還有精神安定作用和抑制大腸癌等其它生理功能。另外GABA還具有促進生長激素分泌的作用,口服5克GABA可使血液中的生長激素(hGH)顯著提高,超過5ng/ml。hGH是人體內含量的幾種激素之一,由于影響全身細胞、骨骼、肌肉和器官的生長,因此對于人體新陳代謝和各種生理功能有著廣泛的調節作用,本章研究了富含GABA的米胚芽在功能方面的作用。3.2材料與設備 Glu直接轉化富集GABA的米胚芽粉:第二章中所制備而得。3.3功能實驗方法本實驗動物選用無錫市原子技術研究所繁育場提供的二級健康昆明種雄性小鼠。3.3.1 分組方法以及劑量的選擇將小鼠隨機分為三組,每組10只,組間體重t檢驗無差別。劑量選擇按照GABA在促進人生長激素分泌的推薦量(30-80mg/kgbw)的10倍為參照,即300mg/kgbw左右設定三個劑量組,按GABA的含量來確定米胚芽粉的添加量。組為對照組,喂以普通飼料;第二組為劑量Ⅰ組,在普通飼料中添加1.5g/kg的米胚芽粉,相當于GABA的劑量為100mg/kgbw第三組為劑量Ⅱ組,,在普通飼料中添加4.5g/kg的米胚芽粉,相當于GABA的劑量為300mg/kgbw第四組為劑量Ⅲ組,,在普通飼料中添加7.5g/kg的米胚芽粉,相當于GABA的劑量為500mg/kgbw。各組連續給予受試物4周后,測定各指標。3.3.2小鼠附重游泳實驗運動耐力的提高是能力加強有力的宏觀表現,游泳時間的長短可以反應動物運動疲勞的程度。末次給予受試物30min后,給小鼠尾部附體重5%的鉛絲。將小鼠放置于25℃的水中,記錄小鼠自游泳開始至頭部全部沒入水中,8s不能浮出水面的時間,作為游泳時間。3.3.3小鼠爬桿實驗爬桿時間的長短可以反應動物靜用力時疲勞的程度。直徑0.8-1cm、長約25cm的玻璃圓棒,上端固定于木板上,下端懸空,距地面約20cm。將爬桿架置于水溫15℃、深約10cm的水盆中。末次給予受試物30min后開始實驗,將小鼠放在玻璃棒上,使肌肉處于靜力緊張狀態,記錄小鼠由于肌肉疲勞從玻璃棒上跌落下來的時間,第三次落水時終止實驗,累計三次的時間作為爬桿時間。3.3.4血清尿素氮的測定末次給予受試物30min后,將小鼠置于25℃的水中游泳30min,摘除眼球取血,使用試劑盒法測定尿素氮的含量。3.3.5血乳酸的測定末次給予受試物30min后,將小鼠放置于25℃的水中游泳30min,摘除眼球取血,使用對羥基聯苯法測定血乳酸的含量。3.3.6肝糖原的測定 末次給予受試物30min后,將小鼠放置于25℃的水中游泳30min,處死后迅速的取出肝臟,以生理鹽水沖洗干凈,用濾紙吸干后準確稱量0.25g肝臟置于有1.5ml30%KOH的試管中,沸水浴煮沸20min,使肝臟組織全部溶解。流水中冷卻,將管中全部轉移到50ml的容量瓶中,混勻,按照蒽酮比色法測定糖含量。3.3.8 統計方法實驗結果以x±s表示,組間進行F檢驗。3.4試驗結果3.4.1各劑量組對小鼠體重的影響表3-1各劑量組對小鼠體重的影響
組 別 | 動物數 | 實驗前體重(g) | 實驗后體重(g) |
空白組 | 10 | 263.7±11.8 | 381.5±31.3 |
劑量Ⅰ組 | 10 | 256.8±12.7 | 375.4±34.3 |
劑量Ⅱ組 | 10 | 257.3±10.3 | 378.1±27.2 |
劑量Ⅲ組 | 10 | 2609.7±9.2 | 378.3±28.1 |
由表3-1可見,飼料中添加富含GABA的米胚芽粉對小鼠正常生長和體重增加沒有影響。3.4.2各劑量組對小鼠游泳實驗的影響 表3-2 各劑量組對小鼠游泳時間的影響
組 別 | N(只) | 游泳時間(min) |
對照組 | 10 | 5.341±4.101 |
劑量Ⅰ組 | 10 | 10.982±7.811* |
劑量Ⅱ組 | 10 | 12.571±8.901** |
劑量Ⅲ組 | 10 | 12.978±4.313** |
注:*是與對照組比較,P<0.05,**是與對照組比較,P<0.01由表3-2可見,與對照組相比,三個劑量組對小鼠游泳時間都有延長作用,其中劑量Ⅰ組延長了103.8%(P<0.05),劑量Ⅱ組延長了131.5%(P<0.01),劑量Ⅲ組延長了139.0%(P<0.01)。3.4.3各劑量組對小鼠爬桿實驗的影響表3-3 各劑量組對小鼠爬桿時間的影響
組 別 | N(只) | 爬桿時間(min) |
對照組 | 10 | 396.121±20.327 |
劑量Ⅰ組 | 10 | 609.857±18.891 |
劑量Ⅱ組 | 10 | 863.459±21.345* |
劑量Ⅲ組 | 10 | 864.603±17.911** |
注:*是與組比較,P<0.05,**是與組比較,P<0.01由表3-2可見,與對照組相比,三個劑量組對小鼠爬桿時間都有延長作用,其中劑量Ⅰ組延長了54.0%,劑量Ⅱ組延長了118.0%(P<0.05),劑量Ⅲ組延長了118.3%(P<0.01)。3.4.4 各個劑量組對小鼠生化指標的影響表3-4各劑量組對小鼠血清尿素、血乳酸以及肝糖原的影響
組 別 | N(只) | 血清尿素氮含量(mmol/L) | 血乳酸含量(mg/ml) | 肝糖原含量(g/100g) |
對照組 | 10 | 11.959±2.132 | 2.11±0.51 | 4.324±0.446 |
劑量Ⅰ組 | 10 | 11.754±2.448 | 1.83±0.35 | 12.348±1.796 |
劑量Ⅱ組 | 10 | 11.056±0.467 | 1.78±0.36* | 18.396±3.746* |
劑量Ⅲ組 | 10 | 10.427±0.426* | 1.67±0.52* | 19.064±3.55** |
注:*是與對照組比較,P<0.05,**是與對照組比較,P<0.01由表3-4可見,三個劑量組在對小鼠血清尿素氮、血乳酸以及肝糖原的影響上沒有游泳和爬桿實驗顯著。劑量Ⅲ組對小鼠血清尿素氮和血乳酸的降低是顯著的(P<0.05);劑量Ⅱ組對小鼠血乳酸的降低是顯著的(P<0.05);三個劑量組小鼠肝糖原比對照組都有增加,劑量Ⅱ組和劑量Ⅲ組的增加都具有顯著性(P<0.05和P<0.01)。根據中國衛生部關于保健性食品的評價指標,對于性試驗項目有:附重游泳試驗、爬桿試驗、血乳酸、血清尿素試驗和肝糖原試驗,若1項以上(含1項)運動試驗和2項以上(含2項)生化指標為陽性,即可判斷該受試物具有的作用。在上面的試驗中,劑量Ⅲ組在小鼠附重游泳時間、爬桿時間、血清尿素含量、血乳酸含量和肝糖原含量均于對照組具有顯著性,劑量Ⅱ組在小鼠附重游泳時間、爬桿時間、血乳酸含量和肝糖原含量于對照組具有顯著性,可以判定劑量Ⅱ組和劑量Ⅲ組受試物具有的作用。因此富含GABA的米胚芽具有的作用,可以作為功能食品的配料。但是對于富含GABA的米胚芽作用的機理還有待于進一步探討,從游泳和爬桿實驗來看,富含GABA的米胚芽的作用是十分顯著的,但是生化指標卻未能與之十分吻合,說明富含GABA的米胚芽的作用機理可能在于對小鼠運動能力的提高,如肌肉增強等,這方面還有待于深入研究。
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