供應黃曲霉毒素M1試劑盒（AFM1）

黃曲霉毒素M1檢測試劑盒說明書

1．概述

本產品是一敏感的用于定量檢測黃曲霉毒素M₁的免疫學檢測方法。適用于牛奶和一些乳制品中黃曲霉毒素M₁的檢測。如果有必要可以利用HPLC, GC/MS方法加以證實。

2.安全性說明

試劑盒含有少量的黃曲霉毒素M₁；底物中含有四甲基聯苯胺；終止液中含有稀硫酸，避免皮膚和粘膜接觸終止液；以上各溶劑不小心滴到皮膚上請用水沖洗。

3.存儲和穩定性

存儲：4–8℃

在使用前試劑盒的溫度要恢復到室溫(20-25℃)。

試劑在有效期內都可以使用。

4．原理

此試劑盒是通過AFM1抗體來檢測AFM1的。將標準品或樣品加入到微孔中和包被在微孔底部的抗AFM1的高親和力抗體發生反應。如果樣品中存在AFM1，它將和包被的抗體結合，此過程孵育30分鐘，洗板。然后加入HRP（辣根過氧化物酶）標記的毒素，酶標記毒素與標準品或者樣品與抗體沒有結合的部位相結合。孵育60分鐘，倒出孔里的液體，清洗后加入顯色底物作用20分鐘，在酶的作用下孔里將會出現藍色。顯色顏色的深淺與結合的酶結合物的量成正比例的關系，與標準品或樣品中AFM1的量成反比例關系。所以，標準品或樣品中的AFM1濃度越高，顯色的藍色將會越淺。加入酸，終止反應，底物顏色由藍色變為棕黃色。微孔板放進酶標儀里，在OD_450nm讀取吸光度值。樣品的吸光度值與試劑盒中標準OD值相比較，相對應得出結果。

5.缺陷

在樣品中出現的很多和無機物在檢測中是不發生反應的，然而樣品中那些易變性的物質產生的基質效應是不可以完全避免的。奶中的脂肪對測定就有影響，因此奶在檢測時要脫脂。在操作中發生錯誤也能引起誤差，比如試劑盒的存儲，錯誤的加液順序，試劑加入的量不準確，在免疫反應或底物反應中太長或太短的孵育時間，太高或太低的孵育溫度。

6．黃曲霉毒素M1測定的重要性

黃曲霉毒素(Aflatoxin, AF）是由多種霉菌代謝的毒性產物，例如Asperillus flavus和Asperillus parasiticus霉菌。他們具有致癌性，存在于谷物、堅果、棉籽和其它人類食物或動物飼料中。谷物可能被黃曲霉毒素的衍生物：B1、B2、G1和G2其中一種污染或者被多種毒素污染。AFB1是目前檢測到的最毒的毒素。其他類型毒素如果污染的濃度很高也存在很大的危險。黃曲霉毒素能夠引發人類很多病癥包括肝癌、黃曲霉中毒、萊耶綜合癥和慢性肝炎。動物很容易攝取到黃曲霉毒素，因為動物吃的飼料在生長、收割和貯存過程中能被黃曲霉毒素產生的真菌毒素污染。當奶牛吃了被污染的飼料，AFB1在體內羥基化轉化成AFM1，AFM1常在牛乳中被檢測到。如果牛初乳中存在AFM1，針對一般的牛奶處理方法例如巴氏殺菌，但AFM1是非常穩定的，它可能一直留存到人類最終消費產品中。世界上大多數國家的政府已經對人類和動物性食品中制定了嚴格的黃曲霉毒素限量標準。很多國家已經聲明降低牛奶和奶制品中的AFM1限量標準。歐盟已經將牛奶和奶制品中AFM1的限量定為：原奶：0.05ppb；嬰兒奶：0.025 ppb；嬰兒食品：0.025 ppb

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