血球計數板是顯微鏡直接計數法最常用的一種計菌儀器，是一種專門用于計算較大單細胞微生物的器材，由于操作簡單快捷，并可以對細胞形態進行分析，因此在微生物實驗室廣泛使用。
簡介
血球計數板是由一塊比普通載玻片厚的特質玻片制成，玻片中部有四條下凹的槽，將玻片分為三個平臺，中間的平臺較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個方格網。方格網上有9個大方格，其中只有中間的一個大方格為計數室。常見的血球計數板的計數室有兩種規格，一種是25×16型，稱為希里格式血球計數板，此計數板分25個中方格，每個中格分16個小方格；一種是16×25型，稱為麥氏血球計數板，此血球計數板分16個中方格，每個中格分25個小方格，這兩種規格的共同點是均有400個小方格組成。計數室的長寬均為1mm，深度為0.1mm，其容積為0.1mm3。用血球計數板計數時，先測定每個小方格（或中方格）的微生物量，再換算成每mL菌液（或每g樣品）中微生物細胞的數量。由于血球計數板比較厚，不能使用油鏡觀察，因此不適合觀察較小的細菌。
操作步驟
1.先在顯微鏡下檢查計數板的計數室，看有無雜質或菌體，若不凈則用沾有95%酒精的脫脂棉輕輕擦洗，再用蒸餾水沖凈，最后用濾紙吸干水分后用擦鏡紙擦凈。
2.用無菌水稀釋菌液，直至菌液稀釋到每小格的菌數可數，大約每格60-100個細菌。
3.用滴管吸取少許搖勻的菌液，從計數板的中間平臺兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴（不宜過多），菌液利用毛細管作用沿兩玻片間自行滲入計數室，切勿有氣泡產生，并用吸水紙吸取溝槽內多余的菌液。也可在計數區直接滴加菌液，然后蓋上蓋玻片，利用毛細作用讓菌液充滿計數區，避免有氣泡產生。
4.靜置5min左右，先在低倍物鏡下找到計數室的位置，再轉換到高倍鏡下計數。
5.計數時用25中格計數板，按對角線方位，取計數室四個角和中央5個中格（即80個小格）的菌數；計數板是16中格的計數板，按對角線方位，取四個角的四個中格（即100個小格）的菌數。觀察計數時，要不斷的調節顯微鏡的微調螺旋，在不同的焦距下看到計數室內不同空間位置的菌體，避免遺漏。對于中格線上的菌體，計數時定好規則，如數上線不數下線，數左線不數右線，以減少誤差。重復計數2-3次（數值相差不應過大，否則要重新計數），取幾次的平均值，按公式計算出每mL菌液所含菌量。
每mL菌液的含菌數=每小格菌的數量×400×10000×稀釋倍數
25×16規格的計數板：
菌數/mL=80個小格中菌數/80×400×10000×稀釋倍數
16×25規格的計數板：
菌數/mL=100個小格中菌數/100×400×10000×稀釋倍數
6.用后的血球計數板要用水流柱清洗干凈，不要用刷子等刷洗，避免損壞網格刻度。洗凈后自然晾干或用濾紙吸干水后再用擦鏡紙擦干凈。對于有致病性的菌，要先在5%石碳酸溶液中消毒后，再清洗干凈。
當然，血球計數板的缺點也是很明顯的，首先是食品顆粒與細胞不易區分，活性細胞和非活性細胞都被計數，因此計數結果比平板計數法要高，部分微生物細胞不易分散均勻，有一些細胞可能沒被計數，另外長時間操作計數也容易引起眼部疲勞。
簡介
血球計數板是由一塊比普通載玻片厚的特質玻片制成，玻片中部有四條下凹的槽，將玻片分為三個平臺，中間的平臺較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個方格網。方格網上有9個大方格，其中只有中間的一個大方格為計數室。常見的血球計數板的計數室有兩種規格，一種是25×16型，稱為希里格式血球計數板，此計數板分25個中方格，每個中格分16個小方格；一種是16×25型，稱為麥氏血球計數板，此血球計數板分16個中方格，每個中格分25個小方格，這兩種規格的共同點是均有400個小方格組成。計數室的長寬均為1mm，深度為0.1mm，其容積為0.1mm3。用血球計數板計數時，先測定每個小方格（或中方格）的微生物量，再換算成每mL菌液（或每g樣品）中微生物細胞的數量。由于血球計數板比較厚，不能使用油鏡觀察，因此不適合觀察較小的細菌。
操作步驟
1.先在顯微鏡下檢查計數板的計數室，看有無雜質或菌體，若不凈則用沾有95%酒精的脫脂棉輕輕擦洗，再用蒸餾水沖凈，最后用濾紙吸干水分后用擦鏡紙擦凈。
2.用無菌水稀釋菌液，直至菌液稀釋到每小格的菌數可數，大約每格60-100個細菌。
3.用滴管吸取少許搖勻的菌液，從計數板的中間平臺兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴（不宜過多），菌液利用毛細管作用沿兩玻片間自行滲入計數室，切勿有氣泡產生，并用吸水紙吸取溝槽內多余的菌液。也可在計數區直接滴加菌液，然后蓋上蓋玻片，利用毛細作用讓菌液充滿計數區，避免有氣泡產生。
4.靜置5min左右，先在低倍物鏡下找到計數室的位置，再轉換到高倍鏡下計數。
5.計數時用25中格計數板，按對角線方位，取計數室四個角和中央5個中格（即80個小格）的菌數；計數板是16中格的計數板，按對角線方位，取四個角的四個中格（即100個小格）的菌數。觀察計數時，要不斷的調節顯微鏡的微調螺旋，在不同的焦距下看到計數室內不同空間位置的菌體，避免遺漏。對于中格線上的菌體，計數時定好規則，如數上線不數下線，數左線不數右線，以減少誤差。重復計數2-3次（數值相差不應過大，否則要重新計數），取幾次的平均值，按公式計算出每mL菌液所含菌量。
每mL菌液的含菌數=每小格菌的數量×400×10000×稀釋倍數
25×16規格的計數板：
菌數/mL=80個小格中菌數/80×400×10000×稀釋倍數
16×25規格的計數板：
菌數/mL=100個小格中菌數/100×400×10000×稀釋倍數
6.用后的血球計數板要用水流柱清洗干凈，不要用刷子等刷洗，避免損壞網格刻度。洗凈后自然晾干或用濾紙吸干水后再用擦鏡紙擦干凈。對于有致病性的菌，要先在5%石碳酸溶液中消毒后，再清洗干凈。
當然，血球計數板的缺點也是很明顯的，首先是食品顆粒與細胞不易區分，活性細胞和非活性細胞都被計數，因此計數結果比平板計數法要高，部分微生物細胞不易分散均勻，有一些細胞可能沒被計數，另外長時間操作計數也容易引起眼部疲勞。
