摘要:四種酵母培養基的配制方法與原理,主要包括麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的制備原理和方法。
本文主要介紹了四種酵母培養基的配制方法與原理,主要包括麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的制備原理和方法。具體如下:
基
本
原
理
麥芽汁培養基和馬鈴薯葡萄糖培養基被廣泛用于培養酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養基有時也可用于培養放線菌。豆芽汁葡萄糖培養基也是培養酵母菌及霉菌的一種優良培養基。察氏培養基主要用于培養霉菌觀察形態用。麥芽汁培養基為天然培養基,馬鈴薯葡萄糖培養基和豆芽汁葡萄糖培養基二者均為半合成培養基,而察氏培養基則為合成培養基。培養基配方中出現的自然pH系指培養基不經酸、堿調節而自然呈現的pH。
實
驗
材
料
1)藥品
葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、瓊脂。
(2)儀器
天平、高壓蒸汽滅菌鍋。
(3)玻璃器皿
移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養皿、玻璃漏斗等。
(4)其他物品
藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。
實
驗
內
容
(一)麥芽汁培養基的配制
1.培養基成分:新鮮麥芽汁一般為10-15波林。
2.配制方法:
(1)用水將大麥或小麥洗凈,用水浸泡6-12h,置于15℃陰涼處發芽,上蓋紗布,每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長至麥粒的兩倍時,讓其停止發芽,曬干或烘干,研磨成麥芽粉,貯存備用。
(2)取一份麥芽粉加四份水,在65℃水浴鍋中保溫3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如無藍色出現,即表示糖化完全)。
(3)糖化液用4-6層紗布過濾,濾液如仍混濁,可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清,加水20ml,調勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過濾)。
(4)用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15波林,調pH至6.4。如當地有啤酒廠,可用未經發酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到10-15波林后使用。
(5)如配固體麥芽汁培養基時,加入2%瓊脂,加熱融化,補充失水。
(6)分裝、加塞、包扎。
(7)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
(二)馬鈴薯葡萄糖培養基的配制
1.培養基成分:馬鈴薯20g、葡萄糖2g、瓊脂1.5-2g、水100ml、自然pH
2.配制方法:
(1)配制20%馬鈴薯浸汁取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000ml。80℃浸泡lh,用紗布過濾,然后補足失水至所需體積。100Pa滅菌20min。即成20%馬鈴薯浸汁,貯存備用。
(2)配制時,按每100ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續加熱融化并補足失水。
(3)分裝、加塞、包扎。
(4)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
(三)豆芽汁葡萄糟培養基的配制
1.培養基成分:黃豆芽10g、葡萄糖5g、瓊脂1.5-2g、水100ml、自然pH
2.配制方法:
(1)稱新鮮黃豆芽10g,置于燒杯中,再加入100ml水,小火煮沸30min,用紗布過濾,補足失水,即制成10%豆芽汁。
(2)配制時,按每100ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2g瓊脂,繼續加熱融化,補足失水。
(3)分裝、加塞、包扎。
(4)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
(四)察氏(czapck)培養基的配制
1.培養基成分:蔗糖3g、NaN030.3g、K2HP040.1g、KCl0.05g、MgSO4·7H2O0.05g、FeS040.001g、瓊脂1.5-2g、蒸餾水100ml、自然pH
2.配制方法
(1)稱量及溶化量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中,分別稱取蔗糖、NaNO3、K2HP04、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培養基加入1ml0.1%的FeS04溶液。
(2)定容候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。
(3)加瓊脂加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水。
(4)分裝、加塞、包扎。
(5)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
注
意
事
項
這四種培養基的配制無需用酸或者堿調節pH,滅菌20分鐘足夠了,時間過長容易把培養基成分破壞掉,太短了容易造成污染。
本文主要介紹了四種酵母培養基的配制方法與原理,主要包括麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的制備原理和方法。具體如下:
基
本
原
理
麥芽汁培養基和馬鈴薯葡萄糖培養基被廣泛用于培養酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養基有時也可用于培養放線菌。豆芽汁葡萄糖培養基也是培養酵母菌及霉菌的一種優良培養基。察氏培養基主要用于培養霉菌觀察形態用。麥芽汁培養基為天然培養基,馬鈴薯葡萄糖培養基和豆芽汁葡萄糖培養基二者均為半合成培養基,而察氏培養基則為合成培養基。培養基配方中出現的自然pH系指培養基不經酸、堿調節而自然呈現的pH。
實
驗
材
料
1)藥品
葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、瓊脂。
(2)儀器
天平、高壓蒸汽滅菌鍋。
(3)玻璃器皿
移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養皿、玻璃漏斗等。
(4)其他物品
藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。
實
驗
內
容
(一)麥芽汁培養基的配制
1.培養基成分:新鮮麥芽汁一般為10-15波林。
2.配制方法:
(1)用水將大麥或小麥洗凈,用水浸泡6-12h,置于15℃陰涼處發芽,上蓋紗布,每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長至麥粒的兩倍時,讓其停止發芽,曬干或烘干,研磨成麥芽粉,貯存備用。
(2)取一份麥芽粉加四份水,在65℃水浴鍋中保溫3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如無藍色出現,即表示糖化完全)。
(3)糖化液用4-6層紗布過濾,濾液如仍混濁,可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清,加水20ml,調勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過濾)。
(4)用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15波林,調pH至6.4。如當地有啤酒廠,可用未經發酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到10-15波林后使用。
(5)如配固體麥芽汁培養基時,加入2%瓊脂,加熱融化,補充失水。
(6)分裝、加塞、包扎。
(7)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
(二)馬鈴薯葡萄糖培養基的配制
1.培養基成分:馬鈴薯20g、葡萄糖2g、瓊脂1.5-2g、水100ml、自然pH
2.配制方法:
(1)配制20%馬鈴薯浸汁取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000ml。80℃浸泡lh,用紗布過濾,然后補足失水至所需體積。100Pa滅菌20min。即成20%馬鈴薯浸汁,貯存備用。
(2)配制時,按每100ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續加熱融化并補足失水。
(3)分裝、加塞、包扎。
(4)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
(三)豆芽汁葡萄糟培養基的配制
1.培養基成分:黃豆芽10g、葡萄糖5g、瓊脂1.5-2g、水100ml、自然pH
2.配制方法:
(1)稱新鮮黃豆芽10g,置于燒杯中,再加入100ml水,小火煮沸30min,用紗布過濾,補足失水,即制成10%豆芽汁。
(2)配制時,按每100ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2g瓊脂,繼續加熱融化,補足失水。
(3)分裝、加塞、包扎。
(4)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
(四)察氏(czapck)培養基的配制
1.培養基成分:蔗糖3g、NaN030.3g、K2HP040.1g、KCl0.05g、MgSO4·7H2O0.05g、FeS040.001g、瓊脂1.5-2g、蒸餾水100ml、自然pH
2.配制方法
(1)稱量及溶化量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中,分別稱取蔗糖、NaNO3、K2HP04、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培養基加入1ml0.1%的FeS04溶液。
(2)定容候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。
(3)加瓊脂加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水。
(4)分裝、加塞、包扎。
(5)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
注
意
事
項
這四種培養基的配制無需用酸或者堿調節pH,滅菌20分鐘足夠了,時間過長容易把培養基成分破壞掉,太短了容易造成污染。