有報道稱生物實驗室內有30%-60%的細胞都被支原體污染過,目前,支原體的發現和清除仍然困擾著許多實驗室以及研究者,各種試劑以及方法都各有利弊,并且有時候支原體被清除之后,仍然會反反復復,帶來許多后顧之憂,尋找一種快速高效簡便的方法來清除以及檢測支原體,仍然是一個十分迫切的問題。
支原體污染在細胞長期培養過程中經常出現且不易消除,據調查及研究顯示,實驗室30%-60%細胞都被支原體污染過,其中95%以上是由口腔支原體(M.orale)等5種造成。支原體污染初期, 高倍鏡下觀察細胞無明顯變化但有細小黑色顆粒;隨培養時間延長,盡管培養液不渾濁,但pH值變化明顯、顏色變黃,在污染后期引起細胞變形,對后續科研產生嚴重影響,因此在細胞培養過程中進行支原體檢測與防治十分必要。
細胞被支原體污染后清除工作特別困難,常見的去除支原體方法包括裸鼠過繼法、克隆法、加熱去除法以及藥物處理方法等。
裸鼠過繼法操作比較繁瑣,易造成裸鼠細胞污染;克隆法只適用于污染較輕的細胞,由于支原體對熱耐受性較差,將細胞置于41℃加熱5-10h(依據細胞本身的耐熱性確定作用時間)以殺滅支原體。由于上述方法的局限性,目前實驗室大多采用抗生素進行處理并取得較好的效果,效抑制支原體活性的抗生素主要為四環素類、大環內酯類等。
細胞培養過程中的支原體,是一個世界性的難題。當細胞(特別是傳代細胞)被支原體污染之后,細胞內部的DNA、RNA以及蛋白表達發生改變,而細胞的生長率一般并未發生顯著的影響,因而細胞被支原體污染一般難以察覺。因此,根據實驗室的管理經驗,支原體污染的預防就顯得尤為重要。
為此,潤聯推出了針對細胞間支原體污染的整體解決方案。
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