蔬菜中農藥多殘留檢測的固相萃取方法
（Copure ® NH2 ）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為水果蔬菜中農殘檢測的前處理方法，LC-MS/MS法作為檢測手段。該方法可簡化樣 品的前處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗目標物
四種農殘標準品：克百威(CAS:1563-66-2)，滅多威(CAS:16752-77-5)，殘殺威(CAS:114-26-1)，多菌靈 (CAS:63090-40-4)。
三、應用范圍
本方法適用于蔬菜和水果中氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定。
四、參考標準
《NY/T 761-2008蔬菜水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定 第三部分》。
五、實驗材料
biocomma ® Copure ® NH 2固相萃取柱 1g/6mL(Cat.No.CONH61000)。
六、實驗方法
1、樣品提取
稱取10.0ｇ韭菜(精確至0.01 g)于50 mL離心管中，加入20 mL乙腈，均質2 min，加入5-7 g氯化鈉，蓋上蓋 子劇烈震蕩5 min，在室溫下靜置10 min，5000 r/min離心4 min，使乙腈和水相分層，取乙腈層待凈化。
2、SPE柱凈化
(1)活化：向NH 柱中加入5 mL甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)活化，棄去流出液。
(2)上樣和洗脫：加入待凈化液，流速控制在1 mL/min內，收集流出液；用5 mL甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)洗 脫，接收流出液；合并流出液。
(3)濃縮定容：40 ℃緩慢氮氣流條件下吹至近干(約0.5 mL)后揮干，用1 mL乙腈-0.1%甲酸水溶液(10:90, v/v)定容至1 mL，過0.45 µｍ微孔濾膜，上液相色譜-質譜儀，待測定。
3、LC-MS/MS條件 質譜儀：AB API4000
色譜柱：C18柱(2.1ｍｍX150ｍｍ，5 µｍ)或相當者 流動相：A: 乙腈;B: 0.1%甲酸水溶液 洗脫方式：梯度洗脫
表1 流動相梯度洗脫程序
進樣體積：20 µL
柱溫：30 ℃
流速：0.3 mL/min或根據儀器條件優化
離子源：電噴霧離子源，正離子模式
檢測方式：多反應監測(MRM)
七、實驗結果
1、韭菜中農藥多殘留0.5mg/kg加標回收結果
表2 韭菜中農藥多殘留0.5mg/kg加標回收結果
2、添加水平為0.5mg/kg韭菜基質中農殘檢測色譜圖
圖1 四種農殘待測物總離子流圖
（Copure ® NH2 ）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為水果蔬菜中農殘檢測的前處理方法，LC-MS/MS法作為檢測手段。該方法可簡化樣 品的前處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗目標物
四種農殘標準品：克百威(CAS:1563-66-2)，滅多威(CAS:16752-77-5)，殘殺威(CAS:114-26-1)，多菌靈 (CAS:63090-40-4)。
三、應用范圍
本方法適用于蔬菜和水果中氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定。
四、參考標準
《NY/T 761-2008蔬菜水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定 第三部分》。
五、實驗材料
biocomma ® Copure ® NH 2固相萃取柱 1g/6mL(Cat.No.CONH61000)。
六、實驗方法
1、樣品提取
稱取10.0ｇ韭菜(精確至0.01 g)于50 mL離心管中，加入20 mL乙腈，均質2 min，加入5-7 g氯化鈉，蓋上蓋 子劇烈震蕩5 min，在室溫下靜置10 min，5000 r/min離心4 min，使乙腈和水相分層，取乙腈層待凈化。
2、SPE柱凈化
(1)活化：向NH 柱中加入5 mL甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)活化，棄去流出液。
(2)上樣和洗脫：加入待凈化液，流速控制在1 mL/min內，收集流出液；用5 mL甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)洗 脫，接收流出液；合并流出液。
(3)濃縮定容：40 ℃緩慢氮氣流條件下吹至近干(約0.5 mL)后揮干，用1 mL乙腈-0.1%甲酸水溶液(10:90, v/v)定容至1 mL，過0.45 µｍ微孔濾膜，上液相色譜-質譜儀，待測定。
3、LC-MS/MS條件 質譜儀：AB API4000
色譜柱：C18柱(2.1ｍｍX150ｍｍ，5 µｍ)或相當者 流動相：A: 乙腈;B: 0.1%甲酸水溶液 洗脫方式：梯度洗脫
表1 流動相梯度洗脫程序
進樣體積：20 µL
柱溫：30 ℃
流速：0.3 mL/min或根據儀器條件優化
離子源：電噴霧離子源，正離子模式
檢測方式：多反應監測(MRM)
七、實驗結果
1、韭菜中農藥多殘留0.5mg/kg加標回收結果
表2 韭菜中農藥多殘留0.5mg/kg加標回收結果
2、添加水平為0.5mg/kg韭菜基質中農殘檢測色譜圖
圖1 四種農殘待測物總離子流圖
