飼料中磺胺類藥物的固相萃取方法
（Copure® ALB）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測飼料中磺胺類藥物的殘留。該方法可簡化樣品的前處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗目標物
磺胺吡啶(CAS:144-83-2)、磺胺甲基嘧啶(CAS:127-79-7)、
磺胺二甲基嘧啶(CAS:57-68-1)、磺胺對甲氧嘧啶(CAS:651-06-9)。
三、應用范圍
本方法適用于飼料中磺胺類藥物殘留的HPLC檢測及確證。
四、參考標準
《GB/T19542-2007食品安全國家標準飼料中磺胺類藥物的測定高效液相色譜法》。
五、實驗材料
biocomma® Copure® 堿性氧化鋁500 mg/6 mL(Cat. No. COALB6500)。
六、實驗方法
1、樣品提取
準確稱取1.0g飼料置于50mL離心管中，加入20mL乙腈，于振蕩器振蕩提取30min，過濾，濾液備用。
2、SPE柱凈化(1)活化：堿性氧化鋁柱使用前用5mL乙腈活化。
(2)上樣和洗脫：取5mL備用濾液過柱，棄去流出液，吹干小柱；用兩次2mL流動相洗脫，收集洗脫液（整個上樣、洗脫過程控制流速在1mL/min內）。
(3)上機測試：洗脫液用流動相定容至4mL，經0.22μm濾膜過濾，供上機測試。
3、HPLC條件設備：Waters Alliance 2695
色譜柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
檢測器：Waters 2487 紫外檢測器
檢測波長：270 nm
等度洗脫：A：乙腈B：0.4%乙酸水溶液
洗脫方式：等度洗脫，A：B=25：75
流速：1.0 mL/min
進樣體積：20μL
七、實驗結果
1、8.0mg/kg飼料基質中磺胺類藥物的添加回收結果
表18.0mg/kg飼料基質中磺胺類藥物的添加回收結果回收率(%)
2、添加水平為8.0mg/kg磺胺類藥物檢測的液相色譜圖
圖1添加水平為8.0mg/kg磺胺類藥物檢測的液相色譜圖
