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公司基本資料信息
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【檢測原理】氯霉素是應用廣泛的抗菌素,對畜禽疾病控制和治療起重要作用。但其存在嚴重的副作用, 能引起人的再生障礙性,粒細胞缺乏癥等疾病,歐美等發達國家已相繼禁止或嚴格禁止使用。
實創生科的氯霉素酶聯免疫試劑盒使用生物技術開發,具有方便、快速、靈敏等特點。
氯霉素酶聯免疫試劑盒利用氯霉素抗體與氯霉素可產生特異性結合的性質,先在酶標板上預包被抗原,再 加入標準品(樣本)和氯霉素酶標抗體,樣本或 標準品中的氯霉素藥物與固定在酶標板上的抗原 競爭氯霉素酶標抗體,加入底物催化顯色。 此時顯色深度與標準品(樣本)中氯霉素藥物的 含量成反比。
【使用方法】
準備:將要使用的酶標板條插入酶標板架上,并記錄各標準品和樣品的位置,為減小檢測值波動建議做雙孔平行實驗(每個樣本/標準品點兩孔),未使用的酶標板條用自封袋密封后,保存于2-8℃環境中以防變質。
加樣:向對應微孔中加入標準品工作液/樣品溶液50μL,再向每孔中加入50μL酶標記物工作液。
孵育:輕輕振蕩酶標板10s,使孔內液體充分混勻后,蓋好蓋板膜于25℃避光反應30 min。
洗滌:取出酶標板后小心揭開蓋板膜,倒出板孔中液體后,在每孔加 250μL洗滌工作液,浸泡15-30s后倒掉洗滌工作液,然后再加入洗滌工作液重復洗滌3-4次后,將酶標板倒置于吸水紙上,用力拍干。
顯色:在每孔中加入100μL 底物A和底物B的混合液(注:底物A液、底物B液必須按體積1:1充分混合,混合液在10 min內使用,切不可使用金屬容器盛裝、攪拌試劑以免底物變質失效)。
孵育:輕輕振蕩酶標板15s,使孔內液體充分混勻后,蓋好蓋板膜于25℃避光反應15-20 min。
終止:在反應后的微孔中加入終止液50μL/孔,底物液由藍變黃表明終止成功。
讀數:終止后的酶標板應在5min內用酶標儀讀數,建議使用450nm、630nm雙波長讀取酶標板吸光度值。
【判定結果】
設各標準品(或樣品)的吸光度平均值為B,零標準(濃度為0ppb的標準品)吸光度平均值B0以(B/B0)×為各標準品(或樣品)對應的吸光度的百分比。
使用半對數系統代入標準品對應的吸光度的百分比,與標準品濃度擬合出標準曲線。
將待檢樣品吸光度的百分比代入擬合出的標準曲線方程中,即可得出樣品對應的濃度, 后乘以樣品相應的稀釋倍數,即可得出樣品中檢測物含量。
氯霉素酶聯免疫試劑盒為定量或半定量試劑盒,建議用于大量樣本篩查分析。若檢測結果為陽性,建議使用儀器方法開展確證實驗(如GC/MS、LC-MS/MS等)
【注意事項】
1、使用試劑盒前,請務必仔細閱讀說明書。
2、試劑盒使用前,需將盒內各組份置于實驗臺上回溫至室溫(25±2℃)(提示:約1 h)。
3、試劑使用前需搖勻,混合時應避免出現氣泡。
4、槍頭為一次性用品,為防止試劑交叉污染,檢測過程中所用槍頭不得重復使用。
5、請勿使用過期試劑盒,不同批號試劑盒中的試劑不得混用。
6、樣品處理完畢后請立即分析,否則可能影響檢測結果。
7、底物A液、底物B液均為無色透明液體,若在使用前已變成藍色,或混合后立即變藍,說明試劑已污染或變質。
8、加樣過程在保證精度的前提下一定要迅速,以免反應時間差對檢測結果產生影響。
9、終止液中含有硫酸,若不小心濺上皮膚或衣物請立即用大量清水沖洗。若不慎入眼,請在徹底清洗后去醫院檢查。
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