|
公司基本資料信息
|
微量法
注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環境污染物降解和木質纖維素降解以
及生物檢測方面有非常廣泛的應用。
測定原理
漆酶分解底物ABTS產生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數遠大于底物ABTS,測定ABTS 自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀。
試劑組成和配制
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。
工作液:粉劑×2 瓶,4℃避光保存,臨用前每瓶加 10mL 試劑一溶解。
樣本處理
將新鮮土樣過40目篩,按照土樣質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取0.1g土樣,加入1mL提取液)加入提取液,30℃震蕩提取30min,于 4℃,10000g,離心10min,取上清置于冰上待測。
測定操作
1. 可見分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長到420nm,蒸餾水調零。
2. 取微量石英比色皿/96孔板,加入30μL上清液,再加入170μL工作液,混勻立即于420nm
處測定吸光值,記為 A1。
3. 記錄完數據立即 30℃震蕩反應 5min 后于420nm 處測定吸光值,記為 A2。△ A=A2-A1
責權聲明:
①本版塊的所有文章及圖片均為客戶自行編輯,其版權為客戶所有,客戶需保證其編輯的文章及圖片均無侵犯任何第三方的合法權益,如被第三方維權,由客戶承擔全部責任;
② 本網站僅為展示平臺,如要轉載,請與我網站聯系協助獲得授權;
③發布內容如有侵權,請及時聯系我網站進行刪除。
※ 聯系電話:400-854-6788