ELISA實驗的操作方法

 測定方法

試劑盒，通常采用固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA)進行測定。具體步驟如下：

‌標準品稀釋與加樣‌：在酶標包被板上設標準品孔，加入不同濃度的標準品。

‌加樣‌：設空白孔和待測樣品孔，加入樣品稀釋液和待測樣品。

‌溫育‌：用封板膜封板后置于適宜溫度(如37℃)溫育一定時間(如30分鐘)。

‌洗滌‌：揭掉封板膜，棄去液體，加入洗滌液洗滌多次。

‌加酶‌：每孔加入酶標試劑(空白孔除外)。

‌再次溫育和洗滌‌：重復溫育和洗滌步驟。

‌顯色‌：加入顯色劑A和B，避光顯色一定時間(如15分鐘)。

‌終止‌：加入終止液終止反應。

‌測定‌：在酶標儀上，通常選擇450nm波長測定各孔的吸光度(OD值)。根據標準品的濃度和對應的OD值繪制標準曲線，然后根據待測樣品的OD值在標準曲線上查找對應的濃度‌。