動(dòng)物性食品中磺胺類藥物多殘留檢測(cè)的固相萃取方法
（Copure® MCX）
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br />本研究利用固相萃取法作為豬肉樣品中磺胺類藥物殘留檢測(cè)的前處理方法，HPLC法作為檢測(cè)手段。Copure ™MCX(60mg/3mL)柱凈化效果良好，回收率滿足測(cè)試要求，重現(xiàn)性好，與知名廠商同型號(hào)柱性能相當(dāng)。
二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物
磺胺醋酰(CAS:144-80-9)，磺胺吡啶(CAS:144-83-2)，磺胺對(duì)甲氧嘧啶(CAS:651-06-9)，磺胺甲基嘧啶(CAS:127-79-7)，磺胺二甲基嘧啶(CAS:57-68-1)
三、應(yīng)用范圍
本方法適用于動(dòng)物性食品中磺胺類藥物多殘留的HPLC檢測(cè)及確證。
四、參考標(biāo)準(zhǔn)
《GB 29694-2013 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中13種磺胺類藥物多殘留的測(cè)定 高效液相色譜法》。
五、實(shí)驗(yàn)材料
Biocomma®Copure® MCX固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COMCX360)；W品牌MCX固相萃取柱60mg/3mL。
六、實(shí)驗(yàn)方法
1、樣品提取
稱取豬肉試料(5±0.05) g，于50 mL離心管中，加乙酸乙酯20 mL，渦旋2 min，4000 r/min離心5 min，取上清液于100 mL雞心瓶中，殘?jiān)屑右宜嵋阴?0 mL，重復(fù)提取一次，合并兩次提取液。雞心瓶中加0.1 mol/L鹽酸溶液4 mL，于40 ℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至少于3 mL，轉(zhuǎn)至10 mL離心管中。用0.1 mol/L鹽酸溶液2 mL洗雞心瓶，轉(zhuǎn)至同一離心管中。再用正己烷3 mL洗雞心瓶，將正己烷轉(zhuǎn)至同一離心管中，渦旋混和30 s，3000 r/min離心5min， 棄正己烷。再次用正己烷3 mL洗雞心瓶，轉(zhuǎn)至同一離心管中，渦旋混和30 s，3000 r/min離心5 min，棄正己烷，取下層液備用。
2、SPE柱凈化
(1) 活化：MCX柱依次用甲醇2 mL和0.1 mol/L鹽酸溶液2 mL活化。
(2) 上樣和洗脫：取備用液過柱，控制流速1 mL/min。依次用0.1 mol/L鹽酸溶液1 mL和50%甲醇乙腈溶液2 mL淋洗，棄去淋洗液。用5%氨化甲醇4 mL洗脫，收集洗脫液。
(3) 重新溶解：洗脫液于40 ℃氮?dú)獯蹈桑?.1％甲酸乙腈溶液1.0 mL溶解殘余物，濾膜過濾，供高效液相色譜測(cè)定。
3、HPLC條件
設(shè)備：Waters Alliance 2690
檢測(cè)器：Waters 2487 雙波長(zhǎng)檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動(dòng)相：A:乙腈 B:0.1%甲酸水溶液
洗脫方式：梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
流速：1 mL/min
柱溫：室溫
進(jìn)樣體積:20µL
七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、0.2mg/kg豬肉基質(zhì)中磺胺的添加回收結(jié)果
表2 0.2mg/kg豬肉基質(zhì)中磺胺的添加回收結(jié)果
表3 W品牌0.2mg/kg豬肉基質(zhì)中磺胺的添加回收結(jié)果
2、添加水平為0.2mg/kg豬肉基質(zhì)中磺胺檢測(cè)色譜圖
圖1 添加水平為0.2mg/kg豬肉基質(zhì)中磺胺檢測(cè)色譜圖
