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菊粉酶(inulinase)是能夠水解β-2,l-D一果聚糖果糖苷鍵的一類水解酶,學名β-2,l-D一果聚糖酶,又叫β一果聚糖酶,2,l-D一果聚糖水解酶(EC 3.2.l)。分泌菊粉酶的微生物在自然界中分布很廣,土壤、水和動物消化道中的多種微生物都能分泌。菊粉酶可以在一定的溫度條件下水解菊粉成果糖或低聚果糖。
菊粉早是從菊科植物中分離出來而得名。菊粉(inulin)是一種有呋喃構形的D一果糖經β-2,l糖苷鍵脫水聚合而成,且在果糖殘基(F)末端連有一個葡萄糖殘基(G)的直鏈結構多糖,是簡單的一類果聚糖,簡寫為GFn(Edelman等,1968)。此外,Emst等(1995)報道,菊粉還含有少量另一類果聚糖(inulonose)即末端無連有G的果聚糖。
根據菊粉酶在微生物體內主要分布于細胞內、細胞壁和細胞外,分別稱為胞內酶、胞壁結合酶和胞外酶,它們的比例主要受菌種、碳源、溫度和pH的影響(Ettalibi等,1990):l)隨著溫度的升高胞外酶比例下降,而其他兩種酶比例上升;2)以菊粉或蔗糖為碳源培養微生物時,前者胞外酶比例高于后者,其他兩種酶則相反;3)胞外酶主要由真菌合成,細胞壁結合酶主要產自酵母;4)適當的pH使細胞壁通透性增大,提高了胸外酶比例,其他兩種酶比例下降。
根據作用底物方式的不同,或者說根據菊粉酶酶切果聚糖鏈方式分為內切酶(EC3.2.1.7)和外切酶(EC3.2.1.80)。通常用I/S的大小來區分內切型菊粉酶和外切型菊粉酶,I是以菊粉作底物時的酶活,S是以蔗糖作底物時的酶活。一般認為外切菊粉酶的I/S值比內切菊粉酶的US低。內切菊粉酶水解菊粉可以得到高純度低聚果糖,常由真菌分離出來。外切菊粉酶在胞內、胞壁、胞外都有分布,它水解菊粉可以得到高純度果糖。
根據來源菊粉酶可以分為微生物菊粉酶和植物菊粉酶
l熱穩定性絕大多數報道中,菊粉酶的適溫度為52~64℃之間,55~58℃適宜。
2 pH值對活力的影響菊粉酶適pH為弱酸性,這一性質不僅操作安全,而且使用過程中可以防止微生物污染,也是果糖穩定的pH值。
3 底物專一性李俊剛等(1999)認為,提高菊粉酶酶解效率的關鍵在于提高酶活和增加底物對酶作用的敏感性。據研究報道,菊粉酶不僅可以對菊粉作用,也可以對蔗糖及棉子糖作用,并表現出更高的活力和水解能力。使用菊芋提取液或菊粉做碳源,都能誘導產生菊粉酶,但菊芋提取液作底物效果更好。這可能是因為提取液除含菊粉外,還含有較多的短鏈的多聚果糖,更有利于菌體的生長以及被酶水解(Pramod等,1991)。也就是說,一定的底物可以誘導生成菊粉酶,但用不同的碳源作底物對酶的活性影響很大。研究發現一定濃度的菊粉、麥芽糖和低濃度的果糖能夠誘導生成菊粉酶,淀粉對菊粉酶的影響不大,葡萄糖卻能明顯地抑制菊粉酶活性。表明菊粉酶有底物專一性。
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