黃芪甲苷為環阿爾廷型三萜皂苷類化合物,是中藥黃芪中的主要有效成分之一,其含量是評價黃芪質量優劣的主要標準。黃芪甲苷具有Chemicalbook抗、、、降糖、保護心肌、抗病毒性心肌炎、保護腦組織、抗乙型肝炎病毒等方面均具有廣泛的藥理作用和非常廣闊。
理化性質:白色至淡黃色粉末 , 熔點295.0~296.0℃。易溶于甲醇、乙醇、丙酮,難溶于氯仿、乙酸乙酯等弱極性溶劑。
1.免疫調節作用將黃芪甲苷、小鼠腹腔巨噬細胞及結核桿菌共同孵育,檢測巨噬細胞對結核桿菌的吞噬能力,并檢測培養液中γ-干擾素(IFN-γ)和白細胞介素-1β(IL-1β)的含量。結果顯示黃芪甲苷的給藥量分別為0.2、0.6、1.5、4.0gL-1時,巨噬細胞吞噬結核桿菌的結核桿菌DNA(TB-DNA)拷貝數以及上清液中IFN-γ和IL-1β的含量均明顯高于對照組。黃芪甲苷具有提高巨噬細胞吞噬結核桿菌的作用。黃芪甲苷能夠在體內和體外促進小鼠T、B淋巴細胞的增殖和抗體生成,促進非胸腺依賴區內B細胞增生、漿細胞大量形成及促進抗體合成的作用,但對胸腺依賴區的T細胞未見明顯影響。2.器官保護作用(1)腦保護作用黃芪甲苷對小鼠瞬間局灶缺血所致的大腦損傷具有保護作用,其作用與作用有關,并有望成為治療中風的臨床藥物。黃芪甲苷對腦缺血再灌注后大鼠血腦屏障具有保護作用。(2)腎臟保護作用黃芪甲苷對缺血再灌注導致的腎損傷具有一定的保護作用,可在腎臟移植時,有效保護腎臟,提高移植成功率。而且黃芪甲苷能下調腎臟組織中單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)的蛋白含量及mRNA的過度表達。(3)肺保護作用黃芪甲苷對于實驗性大鼠的肺部缺血再灌注損傷具有一定的保護作用,能減輕大鼠的肺瘀血、肺灶性出血。黃芪甲苷可以有效抑制卵白蛋白誘導的慢性哮喘。(4)心肌保護作用黃芪甲苷可明顯改善心肌缺血、心肌梗死大鼠心功能,此作用與劑量和時間正相關。給Balb/C小鼠腹腔無菌注射柯薩奇病毒(CVB3)造成病毒性心肌炎模型后,用9%黃芪甲苷灌胃7天,可提高心肌炎小鼠生存率,減少膠原合成和心肌細胞凋亡。(5)肝臟保護作用黃芪甲苷可抑制膠原合成和肝星形細胞增生,對肝細胞纖維化具有明顯的抑制作用。3.降糖作用以2型大鼠為研究對象,研究黃芪甲苷對鏈霉素和高脂飲食誘導的大鼠體內肝葡萄糖酶的調節作用。結果顯示,黃芪甲苷給藥量為25、50mg/kg時可顯著降低大鼠的血糖、甘油三酯(TG)和胰島素水平,并抑制相關mRNA和蛋白表達。另外,黃芪甲苷可抑制TNF-α誘導的3T3-L1脂細胞的脂解作用,從而降低游離脂肪酸(FFA)水平、增加胰島素敏感性,起到、的作用。4.抗細胞凋亡作用黃芪甲苷能夠明顯降低CVB3病毒性心肌炎心肌細胞的凋亡指數。黃芪甲苷對阿霉素誘導的小鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs)的凋亡具有一定的抑制作用,但無明顯的劑量依賴性。5.抗病毒作用黃芪甲苷對二甲苯誘導的小鼠耳腫脹有明顯抑制作用,表現出較強的作用。黃芪甲苷具有抗乙肝病毒的作用。經過10d的給藥治療,在120、40和1Chemicalbook0mg/kg劑量下,其HBV抑制率分別為64.0%、49.6%和41.7%。同時觀察到血清中乙型肝炎病毒(DHBV)DNA水平降低。6.作用黃芪甲苷作用與其能夠清除自由基及抗脂質過氧化作用、促進蛋白質更新、消除核酸代謝障礙及促進人皮膚成纖維細胞的增殖和凋亡有關。黃芪甲苷在較低濃度(5~20mg/L)時可促進皺紋和無皺紋皮膚成纖維細胞增殖,促進皺紋、無皺紋和老年皮膚成纖維細胞Ⅰ型膠原蛋白合成,降低皺紋和無皺紋皮膚成纖維細胞凋亡率。7.促進細胞增殖作用適當濃度的黃芪甲苷可以促進軟骨細胞的快速增殖并保持軟骨細胞的活性,為軟骨組織工程短期內獲得大量的種子細胞并保持軟骨細胞活性提供一條新途徑。8.其他作用黃芪甲苷通過抑制Vav3.1基因的表達,起到一定的活性。通過NO-cGMP通路抑制鈣離子向細胞內流動、抑制胞內鈣離子釋放、抑制去氧和血管緊張素Ⅱ的活性,對大鼠主動脈環血管和離體腸系膜動脈具有一定的舒張作用。測定方法HPLC法測定黃芪甲苷的含量色譜條件:柱:C185u4.6mm×250mm;流動相:乙腈-水(1:2);流速:0.8ml/min;柱溫:25℃;檢測波長:200nm。供試液制備:精密稱取提取物粉末0.1g,加適量水超聲溶解,然后用15ml×4的正丁醇(水飽和)振搖萃取,分取正丁醇層,揮干,殘渣用甲醇溶解并定容至10ml,混勻后過0.45μm的微孔濾膜,即可。標準品溶液制備:精密稱取黃芪甲苷標準品適量,用甲醇溶解,配成濃度為0.1mg/ml的溶液。測定法:用微量進樣器分別吸取供試液及對照液20μl,注入液相色譜儀,記錄峰面積,按峰面積外標法計算其含量。提取工藝黃芪甲苷在黃芪中含量很低,目前黃芪甲苷提取采用的煎煮水提、煎煮回流乙醇提等傳統工藝,具有提取溫度高、提取率低和提取耗時等缺點。的提取技術有高速離心法、微波輔助提取法、超聲提取法、超濾法、超臨界流體萃取技術、超高壓提取法、高速逆流提取法。新的提取技術在提高黃芪甲苷提取率、縮短提取時間、防止活性成分破壞等方面具有重要的作用。CO2超臨界萃取法提取黃芪甲苷工藝:稱取15g黃芪,粉碎至40目,裝入萃取釜,并向其中注入定量的夾帶劑(體積分數75%乙醇)。將萃取釜放入超臨界設備中。調節超臨界二氧化碳流體溫度、壓力,以一定的流速將超臨界流體泵入萃取釜中,萃取液旋風分離收集萃出物,離心濃縮蒸干提取物。二氧化碳超臨界萃取黃芪甲苷的優化工藝條件為:萃取壓力40Mpa,溫度45℃,萃取時間2小時,夾帶劑為95%乙醇,夾帶劑用量4ml(95%乙醇)/g(干黃芪粉),CO2流量10kg/kg.h。
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