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公司基本資料信息
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一、檢測(cè)原理：本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA，在微孔板上預(yù)包被黃曲霉毒素B1 抗原，加入樣本/黃曲霉毒素B1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液及辣根過氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素B1 抗體。樣本或標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的黃曲霉毒素B1 與預(yù)包被在微孔板上的黃曲霉毒素B1 抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合辣根過氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素B1 抗體。未結(jié)合的酶標(biāo)抗體在洗滌時(shí)被除去。再加入TMB 顯色液，讀取吸光值。樣本的吸光值與其所含殘留物黃曲霉毒素B1 抗原的含量成負(fù)相關(guān)。對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可得出相應(yīng)殘留物黃曲霉毒素B1 的含量。
二、檢測(cè)范圍
本試劑盒是應(yīng)用ELISA 技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)比較，能經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)出玉米、大米、麥類、豆類、花生、飼料、食用油等樣本中的黃曲霉毒素B1。
三、試劑盒組成:酶標(biāo)板1 塊，96 孔/板
標(biāo)準(zhǔn)液6 瓶（1 mL/瓶）：0 ppb,0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7 ppb，8.1 ppb
酶標(biāo)記物…………………6mL 底物液A ………………7mL
底物液B…………………7mL 終止液…………………7 mL
10×濃縮洗滌液………40mL 7×濃縮樣品稀釋液………20mL
說明書… … … … …1 份
四、使用單位需自備的設(shè)備及試劑
（1）儀器：微孔板酶標(biāo)儀(450 nm/630 nm);離心機(jī)；粉碎機(jī)；電子天平（感量0.01 g）
（2）器材；單道微量移液器：20 μL～200 μL，100 μL~1000 μL
多道微量移液器：30 μL～300 μL
（3）試劑：甲醇、去離子水
五、溶液的配制
樣本前處理需配制：
配液1：樣品稀釋液：將濃縮樣品稀釋液用去離子水按1:6 體積比進(jìn)行稀釋（1 份濃縮樣品稀釋液+6 份去離子水）。
配液2：洗滌工作液：將濃縮洗滌液用去離子水按1:9 體積比進(jìn)行稀釋（1 份濃縮洗滌液+9 份去離子水）。
六、樣本前處理方法
樣本處理前須知：處理任何樣本時(shí)，都須注意：
（1）實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
（2）實(shí)驗(yàn)前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈，須使用潔凈實(shí)驗(yàn)器具，以免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
樣本前處理步驟：
（A）飼料（半成品、成品等）
1. 取1g 粉碎的樣品與10mL 純甲醇混合均勻；2. 強(qiáng)力振蕩3min；3. 4000r 離心5min；
4. 取上層清液200μL，加入800μL 樣品稀釋液，混合均勻；5. 取50μL 稀釋后液體待測(cè)。
稀釋倍數(shù)：50
（B）谷物（大米、小米、玉米、小麥）
1. 取1 g 粉碎樣品，加入4 mL50%甲醇-水混合均勻；2. 充分振蕩混勻3-5 min；
3. 4000 r/min 離心5min，或用定量分析濾紙過濾；
4. 取400μL 離心后的上清液或過濾后的濾液加入到600μL樣品稀釋液中進(jìn)行稀釋并充分混勻； 5. 取50 μL 稀釋后的樣品待測(cè)。稀釋倍數(shù)：10
七、酶聯(lián)免疫檢測(cè)步驟: 測(cè)定前須知
1、使用之前將所有試劑和需用微孔板回升至室溫。2、使用之后立即將所有試劑放回2~8 ℃。
3、在使用中不要讓微孔干燥。4、在ELISA 分析中的重復(fù)性，很大程度上取決于洗板的一
致性，正確的洗板操作是ELISA 測(cè)定程序中的要點(diǎn)。5、在所有恒溫孵育過程中，避免光線照射，用蓋板膜蓋住微孔板。
測(cè)定步驟：
1、將所需試劑和微孔板從冷藏環(huán)境中取出，在室溫下平衡30 min，每種液體使用前均須搖勻。注意標(biāo)準(zhǔn)液均需做2個(gè)平行試驗(yàn)。
2、加標(biāo)準(zhǔn)品：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50 mL 到對(duì)應(yīng)的微孔中，再加入酶標(biāo)記物50 mL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫(25℃)避光反應(yīng)15 min。
3、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，加洗滌液250μL/孔，每次浸泡15 s，充分洗滌3 次，用吸水紙拍干。
4、顯色：加入底物液A 液50 μL/孔，再加底物液B 液50 μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫(25℃)避光環(huán)境反應(yīng)10 min。
5、測(cè)定：每孔各加50 μL 終止液，設(shè)定酶標(biāo)儀在450 nm 處，測(cè)定OD 值（建議用450/630 nm 雙波長(zhǎng)檢測(cè)，在5 min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)）。
八、結(jié)果分析
所測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)液或樣品吸光度的平均值（B）除以個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液（0 標(biāo)準(zhǔn)液）的吸光度（B0）值再乘以，得到百分吸光度值。百分吸光度值（%）＝ B÷B0×以標(biāo)準(zhǔn)品濃度的10 為底的對(duì)數(shù)為X 軸， 百分吸光值為Y 軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將樣本的百分吸光值代入標(biāo)準(zhǔn)
曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的值，作為10 的冪，乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品中所含黃曲霉B1 的量。
利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣品的準(zhǔn)確、快速分析。
九、試劑盒靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度
試劑盒靈敏度：0.1 ppb
樣本檢測(cè)限：飼料……………5ppb 谷物……………1ppb
回收率：飼料……………83±15% 谷物……………85±15%
精密度：試劑盒的變異系數(shù)均小于10%
十、注意事項(xiàng)
1、室溫低于20 ℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20-25 ℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD 值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象，所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3、反應(yīng)終止液為2M 硫酸，避免接觸皮膚；若不慎滴漏到皮膚上，請(qǐng)盡快用水沖洗。
4、不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。
5、保存試劑盒于2~8 ℃，不要冷凍，將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對(duì)光感，因此要避免直接暴露在光線下。
6、顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之；0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450 nm）值小于0.5（A450nm< 0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
7、在加入底物液后，一般顯色10 min 即可。若顏色較淺，可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到15 min（或更長(zhǎng)），但不得超過30 min；反之，則減短反應(yīng)時(shí)間。
8、該試劑盒反應(yīng)溫度為25 ℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
十一、貯藏條件：在2~8 ℃保存試劑盒。 保存期：本試劑盒有效期為12 個(gè)月
另有黃曲霉毒素M1酶聯(lián)免疫試劑盒96孔48孔，嘔吐毒素酶聯(lián)免疫試劑盒，玉米赤霉烯酮酶聯(lián)免疫試劑盒，玉米赤霉醇酶聯(lián)免疫試劑盒......
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