QuickShuttle 系列轉染試劑說明書產品描述QuickShuttle 系列轉染試劑是一類具有、配方的陽離子型轉染試劑，具有高效、低毒和易于使用等優點，推薦用于常規哺乳動物細胞系的瞬時轉染和穩定細胞系構建。QuickShuttle 區別于常規轉染試劑的兩個最主要特點是：（1）可以在貼壁細胞傳代后尚未貼壁時立即進行轉染（立傳立轉）；（2）轉染操作可在一分鐘內完成。重要提示1. 與常規轉染試劑不同，使用QuickShuttle 可在貼壁細胞傳代后尚未貼壁時直接進行轉染（立傳立轉），從而可節省18~24 小時的轉染前細胞培養時間。2. QuickShuttle 極大簡化了轉染操作，轉染試劑和質粒混合后無需室溫靜置孵育，可直接加入含血清的細胞培養基中進行轉染，而且無需在轉染后補加血清或更換培養基，整個轉染操作可在一分鐘內完成。3. 立傳立轉、一分鐘完成轉染操作和高轉染效率等優點使得部分使用QuickShuttle 的轉染實驗可在細胞傳代后24 小時內完成，從而比常規轉染試劑節約24~48 小時。4. 以24 孔細胞板轉染實驗為例，推薦一次（即每孔）轉染的低內毒素質粒DNA 用量為1~2μg、轉染試劑用量為3~5μl（請在正式實驗前根據不同細胞和不同培養基用報告基因進行優化），質粒和轉染試劑可用無菌生理鹽水稀釋。5. QuickShuttle 經過DMEM、RPMI-1640 和M199 等常規培養基測試，雖然在實驗中推薦使用DMEM，但有實驗結果表明M199 能夠顯著增強QuickShuttle 對Vero 細胞和293FT細胞的轉染效果，因此可嘗試使用不同培養基對轉染條件進行優化。6. QuickShuttle 設計用于常規哺乳動物細胞系的瞬時轉染和穩定細胞系構建，不推薦但可嘗試用于哺乳動物原代細胞和二倍體細胞的轉染。7. QuickShuttle 轉染試劑建議常溫運輸，2~8ºC 保存（在-30 ºC 到室溫范圍內均可長時間穩定保存），無菌取用，有效期18 個月。
QuickShuttle-Enhanced 轉染試劑（增強型）貨號：KX0110042含量：0.8 ml用途：用于難轉哺乳動物貼壁細胞系的瞬時轉染和穩定細胞系構建。注意事項：1. 質粒DNA：請用能夠去除內毒素的方法制備高質量的質粒DNA。2. 稀釋液：0.85%（W/V）生理鹽水，用低內毒素純水配制，高壓消毒或除菌過濾。3. 培養基：經過DMEM、RPMI-1640 和M199 等常規培養基測試，推薦使用含5~10%牛血清的DMEM，若轉染效果不理想可嘗試其它培養基。4. 以24 孔細胞板轉染實驗為例，推薦每孔低內毒素質粒DNA 用量為1~2μg、轉染試劑用量為3~5μl，請在正式實驗前根據不同細胞和不同培養基用報告基因進行優化。5. 如果實驗目的在于篩選抗藥性穩定細胞系，可在細胞傳代后尚未貼壁時直接進行轉染，從而可節省18~24 小時的轉染前細胞培養時間。使用方法1. 轉染前18~24 小時接種細胞到24 孔細胞板中，每孔5~10×104 細胞，1ml 完全培養基。備注：如果篩選抗藥性穩定細胞系，可以考慮簡化的實驗步驟，即在細胞傳代后直接按下述步驟2~5 進行轉染，無需18~24 小時的等候時間。2. 將1~2μg 質粒DNA 和3~5μl 轉染試劑分別稀釋到50μl 生理鹽水中。備注：質粒DNA和轉染試劑的量需要根據不同細胞和不同培養基來優化，但理論上不超出1~2μg和3~5μl 范圍。3. 合并上述兩溶液并混勻。備注：無需其它轉染試劑所需的10~30 分鐘的等候時間。4. 將上述復合物直接加入到細胞培養基中，輕搖細胞板或用加樣器吸打混勻。備注：轉染復合物可直接加入含血清的細胞培養基中進行轉染。在極少情況下會出現貼壁細胞脫落現象，可先從待轉染細胞孔中吸取500μl 培養基與轉染復合物預混后再加入細胞中。若在細胞瓶中進行轉染，直接加入到無細胞貼壁的對面或側面并搖勻即可。5. 將細胞板移至37ºC/5% CO2 孵箱中進行培養。備注：無需在轉染后4~6 小時補加血清或更換培養基。6. 24~72 小時后根據實驗需要進行瞬時表達分析或穩定細胞系加壓篩選。
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