小鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒

小鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒【檢驗方法】
1、試劑、樣本準備

 試劑準備
將試劑盒置室溫（18～26℃）平衡15～30分鐘。
從試劑盒中取出濃縮洗滌液，用新鮮的純化水1：1稀釋后加入洗板機的洗液瓶中。
 樣本準備
標準品的稀釋：用標準品稀釋液按照下圖表將標準品稀釋，制備1-5號標準樣品。為保證結果的準確性，每次實驗請配置新的標準品溶液。
1200 ng/L 5號標準品 150 μL的原倍標準品加入150 μL標準品稀釋液
600 ng/L 4號標準品 150 μL的5號標準品加入150 μL標準品稀釋液
300 ng/L 3號標準品 150 μL的4號標準品加入150 μL標準品稀釋液
150 ng/L 2號標準品 150 μL的3號標準品加入150 μL標準品稀釋液
75 ng/L 1號標準品 150 μL的2號標準品加入150 μL標準品稀釋液
 
2、試驗條件
在室溫（18～26℃）嚴格按照試劑盒說明書進行操作。
 
3、操作步驟

取出所需的PCT抗體包被板反應條置于微孔架上（立即將剩余的微孔反應條放回鋁箔袋中，并重新密封鋁箔袋）。
分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50 μL，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40 μL，然后再加待測樣品10 μL（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，置37℃恒溫箱孵育30分鐘。
小心揭掉封板膜，棄去孔內液體，洗滌液注滿各孔、靜置30秒，甩干，重復5次，拍干。或者利用洗板機洗滌：程序4個循環，每孔350 μL，洗滌后拍干。
加入酶結合物，每孔加入酶標試劑50 μL，空白孔除外，充分混勻，置37℃恒溫箱孵育30分鐘。
重復操作程序③
加入顯色劑A50 μL，再加入顯色劑B50 μL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
每孔加終止液每孔50 μL，充分混勻，終止反應。
以空白孔調0，用酶標儀依序測量各孔在450 nm波長的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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小鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒【檢驗方法的局限性】
PCT的水平作為診斷、監測重癥感染患者的常規指標，不能作為是否存在細菌和病毒感染的依據。對PCT檢測結果的解釋需結合其他臨床檢查結果和根據臨床疾病診斷的程序。
需要注意的是：

在病毒感染或非感染性炎癥反應時，血PCT水平不升高或僅有輕度升高。
PCT水平測定不能特異性反映病原體類型及其對抗生素的敏感性和耐藥性；必須同時結合病原學檢查和藥物敏感試驗結果以提高治療的針對性。
接受OKT3免疫抑制治療的移植患者PCT水平常有提高，這可能是細胞因子釋放綜合征的繼發表現，應用OKT3后PCT水平的升高并不一定提示感染的存在，須結合其他指標綜合分析。
膿毒血癥患者不論是否接受免疫抑制治療，其在發生膿毒癥的最初3天內PCT水平并無差異，隨后免疫缺陷患者在第3～5天時PCT 值有所減低，而免疫力正常的患者至第5天后PCT水平才開始下降,對于膿毒血癥患者建議采取動態觀察。
 
【產品性能指標】

特異性：
20份正常人血清PCT 檢測結果不得出現一份大于500 ng/L。

檢出量：檢出量為40ng/L。
線性范圍：75ng/L～1200ng/L，相關系數r應不低于0.98。
穩定性：37℃放置3天，檢定結果應達到標準。
 
【注意事項】

試劑盒使用前應置于室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
使用時，先將瓶中內容物搖勻，不同批號試劑盒組份請勿混用。
濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
嚴格控制反應時間和顯色時間，一次加樣時間控制在5分鐘內。
本試劑盒為一次性用品，使用后的試劑盒和樣本等廢棄物應作為傳染源按照國家相關規定處理。
底物請避光保存。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準，無效結果必須重測。
本試劑盒采用硫酸作為終止液，其具有輕微的腐蝕性，使用時應避免接觸衣物或眼、手等皮膚暴露部位。

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