1. 菌落總數(shù)檢驗
2. 結(jié)果計數(shù)
•可用肉眼觀察,必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器,記錄稀釋倍數(shù)和相應的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位(colony-formingunits,CFU)表示。
•選取菌落數(shù)在30CFU~300CFU之間、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù)。低于30CFU的平板記錄具體菌落數(shù),大于300CFU的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應采用兩個平板的平均數(shù)。
•其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù);若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘以2,代表一個平板菌落數(shù)。
•當平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長勢,則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。
3. 結(jié)果計算
•若只有一個稀釋度平板上的菌落數(shù)在30~300CFU之間,計算兩個平板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應稀釋倍數(shù),作為每g(mL)樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。
•若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于300CFU,則對稀釋度最高的平板進行計數(shù),其他平板可記錄為多不可計,結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計算。
•若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30CFU,則應按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。
•若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無菌落生長,則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計算。
•若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在30CFU~300CFU之間,其中一部分小于30CFU或大于300CFU時,則以最接近30CFU或300CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。
•若有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時,按式(1)計算:
4. 結(jié)果報告
•菌落數(shù)小于100CFU時,按“四舍五入”原則修約,以整數(shù)報告。
•菌落數(shù)大于或等于100CFU時,第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前2位數(shù)字,后面用0代替位數(shù);也可用10的指數(shù)形式來表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。
•若所有平板上為蔓延菌落而無法計數(shù),則報告菌落蔓延。
•若空白對照上有菌落生長,則此次檢測結(jié)果無效。
•稱重取樣以CFU/g為單位報告,體積取樣以•CFU/mL為單位報告。
•注:菌落總數(shù)結(jié)果計算與報告方式實例見以下表格
編號 | 稀釋倍數(shù)及菌落數(shù) | |||||||
10-1 | 10-2 | 10-3 | 菌落總數(shù) | 報告方式 | ||||
平皿1 | 平皿2 | 平皿1 | 平皿2 | 平皿1 | 平皿2 | (CFU/g或ml) | (CFU/g或ml) | |
1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | ﹤1×10 | ﹤10 |
2 | 24 | 26 | 5 | 7 | 0 | 0 | 250 | 250或2.5×102 |
3 | 多不可計 | 多不可計 | 150 | 160 | 15 | 20 | 15500 | 16000或1.6×104 |
4 | 多不可計 | 多不可計 | 236 | 245 | 35 | 33 | 24955 | 25000或2.5×104 |
5 | 多不可計 | 多不可計 | 236 | 245 | 25 | 33 | 24476 | 24000或2.4×104 |
6 | 多不可計 | 多不可計 | 多不可計 | 多不可計 | 320 | 330 | 325000 | 330000或3.3×105 |
7 | 多不可計 | 多不可計 | 310 | 320 | 28 | 26 | 27000 | 27000或2.7×104 |
8 | 多不可計 | 多不可計 | 295 | 325 | 22 | 20 | 29500 | 30000或3.0×104 |
9 | 菌落蔓延 | 菌落蔓延 | 菌落蔓延 | 菌落蔓延 | 菌落蔓延 | 菌落蔓延 | 菌落蔓延 | 菌落蔓延 |
1質(zhì)量控制
•實驗室過程中,每批樣品稀釋液都要做空白對照。
•為了控制環(huán)境污染,每次檢驗過程中,于檢驗臺上打開兩塊計數(shù)瓊脂平板,并在檢驗環(huán)境中暴露不少于15分鐘,將此平板與本批次樣品同時進行培養(yǎng),以掌握檢驗過程中是否存在來自檢驗環(huán)境的污染。