分光光度法繪制標準曲線所遇問題

1、單色光純度不夠

問題：標準曲線上端向下彎曲。

措施：光度法中要求在最大吸收峰處測定吸光度，光度計的有效譜帶寬度越窄越好，有利于獲得純度高的單色光。

2.比色皿的厚度或光學性能不一致

如果裝試劑空白液的比色皿較其它比色皿薄或對光的吸收和反射少一些，則曲線的延線與縱坐標相交；反之，與橫坐標相交。

3.顯色反應和反應條件的問題

當顯色反應的靈敏度不高時，被測物低于某一濃度就不能顯色，當濃度不同時，溶液對光的吸收、散射的程度不同，低濃度段往往彎曲，加上濃度高時部分膠體顆粒的聚沉，致使測定的吸光度降低，曲線上端向下彎曲。

  4.操作上的原因

問題：褪色反應，顯色溶液的顏色不穩定、易褪色，若比色時間超過了穩定時間，標準系列中高濃度溶液顏色減褪，致使曲線上端向下彎曲。

措施：控制好顯色劑的加入時間，可以每加3份，停3-3min，再加上3份，依次進行，以使每支比色管的顯色時間相近。