一、實操部分（100分）
序號 | 內容 | 評分標準 | 分值 | 得分 |
1 | 準備（滿分20分） | 材料準備充分，中途不得取用非操作臺材料 | 10 | |
顯微鏡取用姿勢準確，安放位置合理 | 10 | |||
2 | 低倍鏡使用（滿分25分） | 插上電源，打開光源，用拇指和中指移動旋轉器（切忌手持物鏡移動 | 5 | |
使低倍鏡對準鏡臺的通光孔，放置載玻片，標本中間對準通光孔，并用壓片夾夾好 | 5 | |||
調節焦距，從一側看著向上調節載物臺， 粗準焦螺旋調節物鏡與載物臺至最小距離處 | 5 | |||
雙眼視目鏡，調節粗準焦螺旋至有模糊的像，然后調節細準焦螺旋至清晰的像，二者不得來回交替使用，且光線強弱適宜（2分）。 | 10 | |||
3 | 高倍鏡使用（滿分20分） | 將觀察對象調至視野中央，轉動轉換器至高倍鏡，防止撞到玻片 | 10 | |
調節細準焦螺旋至清晰的像，光線調節至強弱適宜 | 10 | |||
4 | 油鏡的使用（35分） | 轉動轉換器，使高倍鏡頭離開通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢轉動油鏡，在轉換油鏡時，從側面水平注視鏡頭與玻片的距離，使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。 | 10 | |
如果不出現物象或者目標不理想要重找，在加油區之外重找時應按：低倍→高倍→油鏡程序。在加油區內重找應按：低倍→油鏡程序，不得經高倍鏡，以免油沾污鏡頭（3分），至調出清晰的像。 | 10 | |||
擦拭目鏡和物鏡上的油污，擦鏡紙、二甲苯、(0.5)擦拭方法均要正確(1) | 10 | |||
取下玻片，拔下電源，關上開關，載物臺調至最大距離處，物鏡八字擺開，罩上防塵罩，并認真填寫使用記錄。 | 5 | |||
5 | 計時 | 不得超過5分鐘，超過者倒扣分，最多扣5分 |
革蘭氏染色評分標準
序號 | 考核項目 | 評分要素 | 配分 | 評分標準 | 檢驗結果 | 得分 | 備注 |
1 | 準備（10分） | 著裝整潔；實驗用物齊全適用，放置合理 | 10 | 少選多選1件扣5分 | |||
2 | 制片（40分） | 無菌操作取菌 | 20 | 無菌操作正確規范，錯1處扣5分，涂片區域圓形，直徑1cm左右 | |||
3 | 干燥固定 | 5 | 不可過熱、固定操作的規范性，錯1處扣2分 | ||||
4 | 染色、水洗 | 15 | 染液滴加的量；染色時間，水洗操作的規范性，錯1處扣5分 | ||||
5 | 鏡檢（35分） | 顯微鏡的預備 | 5 | 顯微鏡的檢查；正確放置打開光源，光路對準，錯1處扣2分 | |||
6 | 涂片鏡檢 | 10 | 低倍到高倍，到油鏡，物鏡的轉換；物象調節，錯1處扣2分 | ||||
7 | 鏡檢結果 | 15 | 菌體分布均勻，密度合適，明暗合適，對比度合適。錯1處扣3分 | ||||
8 | 顯微鏡的整理 | 5 | 鏡頭的擦拭；物鏡的“八字形”轉換；將載物臺降到最低，錯1處扣2分 | ||||
9 | 其他（5分） | 清理用物，環境衛生 | 5 | 清掃實驗臺及收拾產生垃圾，少1環節扣1分 | |||
10 | 時間（10分） | 操作時間 | 15 | 要求20分鐘內完成，每超過1分鐘，扣5分。 | |||
總分 | |||||||
平板劃線分離考核標準
序號 | 項目 | 內容 | 滿分(100分) | 評分細則 | 扣分 | 總分 | |
1 | 實驗前的準備 | 準備全所需的所有實驗材料 | 15分 | 3 | 材料準備充分，中途取用物品扣3分 | ||
貼標簽 | 4 | 未貼扣4分，貼錯扣2分；信息不完整扣2分 | |||||
酒精棉球擦拭手與工作臺面 | 4分 | 未擦拭扣4分 | |||||
擦手不徹底最多 2分 | |||||||
擦臺面不徹底最多2分 | |||||||
接種針的灼燒是否徹底，拿法是否科學 | 4分 | 灼燒不徹底，最多扣3分 | |||||
接種環拿法不對，扣1分 | |||||||
未灼燒4分 | |||||||
2 | 從試管中取樣接入培養皿中 | 試管中取菌（15分） | 50分 | 3 | 試管口未灼燒，扣3分 | ||
2 | 持塞手法不正確，扣2分 | ||||||
3 | 接種環未冷卻，扣3分 | ||||||
4 | 塞塞子時未灼燒塞子與管口，扣4分 | ||||||
3 | 試管口離開無菌區，扣3分 | ||||||
手法是否標準(5分) | 1 | 持平板的手法不當扣1分 | |||||
4 | 開口過大扣4分 | ||||||
分區接種（30） | 5 | 有離開5cm酒精燈無菌區1次扣2分，最多扣5分 | |||||
離開無菌區10cm以上一次扣5分 | |||||||
5 | 劃完1區未灼燒，扣5分 | ||||||
5 | 灼燒完未冷卻，扣5分 | ||||||
5 | 單手旋轉平板，有明顯的分區操作 | ||||||
10 | 劃破平板，最多扣10分 | ||||||
3 | 接種完畢，臺面的處理以及培養等 | 臺面的整理：酒精燈熄滅，各試驗器材歸位（4分） | 10分 | 1分 | 熄滅方式不對，扣1分 | ||
3分 | 未歸位 ，扣3分；未整理，扣2分 未帶走垃圾，扣2分。最多扣3分 | ||||||
置入培養箱中倒置培養，以及最適培養溫度的設置（4分） | 4分 | 未倒置，扣2分 | |||||
培養溫度和時間寫在標簽上，未注明扣2分 | |||||||
完成實驗，酒精棉球擦拭手或者洗手（2分） | 2分 | 未擦拭手或洗手 1 | |||||
4 | 結果檢查 | 分離效果 | 20分 | 10分 | 10個以上單菌落，少1個扣1分 | ||
分區效果 | 5分 | 無明顯分區，只有一個區，扣5分 平板無菌落區按占的比例扣分 | |||||
污染情況 | 5分 | 有其他雜菌污染，扣5分 | |||||
5 | 用時 | 5 | 5分鐘，超過1分鐘扣1分 | ||||
